PRUEBA DE PCR PARA ACCIDENTES CEREBROVASCULARES

Diseño y estandarización de una prueba de PCR para la detección específica de Trypanosoma Cruzi.

Objetivo:

 Trypanosoma Cruzi, agente causal de la enfermedad de Changas presenta 2 tipos de unidades H"A: 1,2 y 0,76 kb. Dada la ausencia de la unidad de 1,2 kb en T.Rangeli, en este trabajo se desarrolló una prueba de PCR para la detección de T.Cruzi, usando como blanco este gen.

Tipo de muestra: 
Parásitos de Instituto Nacional de salud (INS)

Tipo de ácido nucleico: 
ADN nuclear

Gen de amplificación: H"A: 1,2 y 0,76 kb

Extracción: Método de Escalante 1997, por medio REI modificado líquido

Tipo de PCR:

PCR en tiempo real y convencional 

15 ciclos de:

Desnaturalización: 95C à 30seg

Hibridación: 92C à 1 min

Extensión: 72 C à 1 min

20 ciclos

Anillaje: 65C à30s

Extensión: 72C -à 30s

Visualización: 
Gel de agarosa 1,5% con bromuro de etidio

Sensibilidad: 1fg

Bibliografia: 

Davies C,Poma R,Marino R, Mora M, Ramos F, Rajal V, Basombrío M.Detección de Trypanosoma cruzi en tejido y sangre murina por PCR convencional y en tiempo reaL.Acta bioquím. clín. latinoam. vol.48 no.4 La Plata dic. 2014